ਵਾਇਰਸ ਨਿਊਕਲੀਇਕ ਐਸਿਡ ਖੋਜ

ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਵਾਇਰਸਾਂ ਦੇ ਜੀਨੋਮਿਕ ਕ੍ਰਮ ਜਾਣੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਪੜਤਾਲਾਂ ਜੋ ਕਿ ਡੀਐਨਏ ਦੇ ਛੋਟੇ ਹਿੱਸੇ ਹਨ ਜੋ ਪੂਰਕ ਵਾਇਰਲ ਡੀਐਨਏ ਜਾਂ ਆਰਐਨਏ ਖੰਡਾਂ ਨਾਲ ਹਾਈਬ੍ਰਿਡਾਈਜ਼ ਕਰਨ ਲਈ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹਨ।ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਚੇਨ ਰਿਐਕਸ਼ਨ (ਪੀਸੀਆਰ) ਵਾਇਰਲ ਖੋਜ ਲਈ ਇੱਕ ਵਧੇਰੇ ਕੁਸ਼ਲ ਤਕਨੀਕ ਹੈ।ਹਾਈ ਥ੍ਰੁਪੁੱਟ ਡਾਇਗਨੌਸਟਿਕ ਵਿਧੀਆਂ ਹਾਲ ਹੀ ਵਿੱਚ ਵਿਕਸਤ ਕੀਤੀਆਂ ਗਈਆਂ ਹਨ।

A. ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਹਾਈਬ੍ਰਿਡਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਤਕਨੀਕ

ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਹਾਈਬ੍ਰਿਡਾਈਜੇਸ਼ਨ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਦੱਖਣੀ ਬਲੋਟਿੰਗ (ਦੱਖਣੀ) ਅਤੇ ਉੱਤਰੀ ਬਲੋਟਿੰਗ (ਉੱਤਰੀ), ਵਾਇਰਸ ਡਾਇਗਨੌਸਟਿਕ ਖੇਤਰ ਵਿੱਚ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਵਿਕਸਤ ਹੋ ਰਹੀ ਨਵੀਂ ਤਕਨੀਕ ਹੈ।ਹਾਈਬ੍ਰਿਡਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਪਰਖ ਦਾ ਤਰਕ DNA (ਜਿਸਨੂੰ "ਪੜਤਾਲ" ਕਿਹਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ) ਦੇ ਛੋਟੇ ਹਿੱਸਿਆਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨਾ ਹੈ ਜੋ ਪੂਰਕ ਵਾਇਰਲ ਡੀਐਨਏ ਜਾਂ ਆਰਐਨਏ ਖੰਡਾਂ ਨਾਲ ਹਾਈਬ੍ਰਿਡਾਈਜ਼ ਕਰਨ ਲਈ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।ਗਰਮ ਜਾਂ ਖਾਰੀ ਇਲਾਜ ਦੁਆਰਾ, ਡਬਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਟਾਰਗੇਟ ਡੀਐਨਏ ਜਾਂ ਆਰਐਨਏ ਸਿੰਗਲ ਸਟ੍ਰੈਂਡਾਂ ਵਿੱਚ ਵੱਖ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਫਿਰ ਇੱਕ ਠੋਸ ਸਹਾਰੇ ਉੱਤੇ ਸਥਿਰ ਹੋ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।ਉਸ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਜਾਂਚ ਨੂੰ ਟੀਚਾ ਡੀਐਨਏ ਜਾਂ ਆਰਐਨਏ ਨਾਲ ਜੋੜਿਆ ਅਤੇ ਹਾਈਬ੍ਰਿਡ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਪੜਤਾਲ ਨੂੰ ਆਈਸੋਟੋਪ ਜਾਂ ਗੈਰ-ਰੇਡੀਓਐਕਟਿਵ ਨਿਊਕਲਾਈਡ ਨਾਲ ਲੇਬਲ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ, ਟੀਚਾ ਡੀਐਨਏ ਜਾਂ ਆਰਐਨਏ ਨੂੰ ਆਟੋਰੇਡੀਓਗ੍ਰਾਫੀ ਦੁਆਰਾ ਜਾਂ ਬਾਇਓਟਿਨ-ਐਵਿਡਿਨ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਦੁਆਰਾ ਖੋਜਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਕਿਉਂਕਿ ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਵਾਇਰਲ ਜੀਨੋਮ ਕਲੋਨ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹਨ ਅਤੇ ਕ੍ਰਮਬੱਧ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹਨ, ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਜਾਂਚਾਂ ਦੇ ਤੌਰ ਤੇ ਵਾਇਰਸ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਕ੍ਰਮਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਖੋਜਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਵਰਤਮਾਨ ਵਿੱਚ, ਹਾਈਬ੍ਰਿਡਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਵਿਧੀਆਂ ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ: ਡਾਟ ਬਲੌਟ, ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਸਿਟੂ ਹਾਈਬ੍ਰਿਡਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ, ਡੀਐਨਏ ਬਲੋਟਿੰਗ (ਡੀਐਨਏ) (ਦੱਖਣੀ ਬਲੌਟ) ਅਤੇ ਆਰਐਨਏ ਬਲੌਟਿੰਗ (ਆਰਐਨਏ) (ਉੱਤਰੀ ਧੱਬਾ)।

B.PCR ਤਕਨਾਲੋਜੀ

ਹਾਲ ਹੀ ਦੇ ਸਾਲਾਂ ਵਿੱਚ, ਅਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲ ਜਾਂ ਗੈਰ ਕਾਸ਼ਤਯੋਗ ਵਾਇਰਸਾਂ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰਨ ਲਈ, ਪੀਸੀਆਰ ਦੇ ਅਧਾਰ ਤੇ ਵਿਟਰੋ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਤਕਨੀਕਾਂ ਦੀ ਇੱਕ ਲੜੀ ਵਿਕਸਿਤ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ।ਪੀਸੀਆਰ ਇੱਕ ਵਿਧੀ ਹੈ ਜੋ ਵਿਟਰੋ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੁਆਰਾ ਖਾਸ ਡੀਐਨਏ ਕ੍ਰਮ ਨੂੰ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਪੀਸੀਆਰ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਵਿੱਚ ਤਿੰਨ ਪੜਾਵਾਂ ਦਾ ਇੱਕ ਥਰਮਲ ਚੱਕਰ ਸ਼ਾਮਲ ਹੁੰਦਾ ਹੈ: ਵਿਕਾਰ, ਐਨੀਲਿੰਗ, ਅਤੇ ਐਕਸਟੈਂਸ਼ਨ ਉੱਚ ਤਾਪਮਾਨ (93℃~95℃), ਡਬਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਦੋ ਸਿੰਗਲ ਡੀਐਨਏ ਸਟ੍ਰੈਂਡਾਂ ਵਿੱਚ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ;ਫਿਰ ਘੱਟ ਤਾਪਮਾਨ (37℃~60℃), ਦੋ ਸਿੰਥੇਸਾਈਜ਼ਡ ਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਪੂਰਕ ਡੀਐਨਏ ਖੰਡਾਂ ਨੂੰ ਐਨੀਲ ਕਰਦੇ ਹਨ;ਜਦੋਂ ਕਿ ਟਾਕ ਐਨਜ਼ਾਈਮ (72℃) ਲਈ ਢੁਕਵੇਂ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ, ਨਵੀਂ ਡੀਐਨਏ ਚੇਨਾਂ ਦਾ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਪ੍ਰਾਈਮਰ 3'ਅੰਤ ਤੋਂ ਪੂਰਕ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਟੈਂਪਲੇਟਸ ਅਤੇ ਸਿੰਗਲ ਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡਜ਼ ਨੂੰ ਸਮੱਗਰੀ ਵਜੋਂ ਵਰਤਦੇ ਹੋਏ ਸ਼ੁਰੂ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਲਈ ਹਰੇਕ ਚੱਕਰ ਦੇ ਬਾਅਦ, ਇੱਕ ਡੀਐਨਏ ਚੇਨ ਨੂੰ ਦੋ ਚੇਨਾਂ ਵਿੱਚ ਵਧਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਨੂੰ ਦੁਹਰਾਉਂਦੇ ਹੋਏ, ਇੱਕ ਚੱਕਰ ਵਿੱਚ ਸੰਸ਼ਲੇਸ਼ਿਤ ਹਰੇਕ ਡੀਐਨਏ ਚੇਨ ਨੂੰ ਅਗਲੇ ਚੱਕਰ ਵਿੱਚ ਟੈਪਲੇਟ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਹਰੇਕ ਚੱਕਰ ਵਿੱਚ ਡੀਐਨਏ ਚੇਨਾਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਦੁੱਗਣੀ ਹੋ ਜਾਂਦੀ ਹੈ, ਜਿਸਦਾ ਮਤਲਬ ਹੈ ਕਿ ਪੀਸੀਆਰ ਦਾ ਉਤਪਾਦਨ 2n ਲੌਗ ਸਪੀਡ ਵਿੱਚ ਵਧਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।25 ਤੋਂ 30 ਚੱਕਰਾਂ ਦੇ ਬਾਅਦ, ਪੀਸੀਆਰ ਦੇ ਉਤਪਾਦਨ ਨੂੰ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਦੁਆਰਾ ਪਛਾਣਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਖਾਸ ਡੀਐਨਏ ਉਤਪਾਦਾਂ ਨੂੰ ਯੂਵੀ ਲਾਈਟ (254nm) ਦੇ ਅਧੀਨ ਦੇਖਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ, ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਅਤੇ ਸਹੂਲਤ ਦੇ ਇਸ ਦੇ ਫਾਇਦੇ ਲਈ, ਪੀਸੀਆਰ ਨੂੰ ਕਈ ਵਾਇਰਲ ਲਾਗਾਂ ਜਿਵੇਂ ਕਿ HCV, HIV, CMV, ਅਤੇ HPV ਦੇ ਕਲੀਨਿਕਲ ਨਿਦਾਨ ਵਿੱਚ ਅਪਣਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।ਕਿਉਂਕਿ ਪੀਸੀਆਰ ਬਹੁਤ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲ ਹੈ, ਇਹ fg ਪੱਧਰ 'ਤੇ ਵਾਇਰਸ ਡੀਐਨਏ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਝੂਠੇ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ ਆਪ੍ਰੇਸ਼ਨ ਬਹੁਤ ਧਿਆਨ ਨਾਲ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਟੈਸਟ ਵਿੱਚ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਤੀਜੇ ਦਾ ਮਤਲਬ ਇਹ ਨਹੀਂ ਹੈ ਕਿ ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਲਾਈਵ ਛੂਤ ਵਾਲਾ ਵਾਇਰਸ ਹੈ।

ਪੀਸੀਆਰ ਤਕਨੀਕ ਦੀ ਵਿਆਪਕ ਵਰਤੋਂ ਦੇ ਨਾਲ, ਵੱਖ-ਵੱਖ ਟੈਸਟਾਂ ਦੇ ਉਦੇਸ਼ਾਂ ਲਈ ਪੀਸੀਆਰ ਤਕਨੀਕ ਦੇ ਆਧਾਰ 'ਤੇ ਨਵੀਆਂ ਤਕਨੀਕਾਂ ਅਤੇ ਵਿਧੀਆਂ ਵਿਕਸਿਤ ਕੀਤੀਆਂ ਜਾਂਦੀਆਂ ਹਨ।ਉਦਾਹਰਨ ਲਈ, ਅਸਲ ਸਮੇਂ ਦੀ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਪੀਸੀਆਰ ਵਾਇਰਲ ਲੋਡ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾ ਸਕਦੀ ਹੈ;ਸਥਿਤੀ ਵਿੱਚ ਪੀਸੀਆਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਟਿਸ਼ੂ ਜਾਂ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਵਾਇਰਸ ਦੀ ਲਾਗ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕਰਨ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ;ਨੇਸਟਡ ਪੀਸੀਆਰ ਪੀਸੀਆਰ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਨੂੰ ਵਧਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਉਹਨਾਂ ਵਿੱਚੋਂ, ਅਸਲ ਸਮੇਂ ਦੀ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਪੀਸੀਆਰ ਨੂੰ ਹੋਰ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਵਿਕਸਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।ਕਈ ਨਵੀਆਂ ਤਕਨੀਕਾਂ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਟਾਕਮੈਨ ਹਾਈਡ੍ਰੋਲਾਈਸਿਸ ਪ੍ਰੋਬ, ਹਾਈਬ੍ਰਿਡਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਪ੍ਰੋਬ, ਅਤੇ ਮੌਲੀਕਿਊਲਰ ਬੀਕਨ ਪ੍ਰੋਬ, ਨੂੰ ਅਸਲ ਸਮੇਂ ਦੀ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਪੀਸੀਆਰ ਤਕਨੀਕ ਵਿੱਚ ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਕਲੀਨਿਕਲ ਖੋਜ ਵਿੱਚ ਵਿਆਪਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।ਮਰੀਜ਼ਾਂ ਦੇ ਸਰੀਰ ਦੇ ਤਰਲ ਵਿੱਚ ਵਾਇਰਲ ਲੋਡ ਦੀ ਸਹੀ ਪਛਾਣ ਕਰਨ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਇਸ ਵਿਧੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਡਰੱਗ-ਸਹਿਣਸ਼ੀਲ ਮਿਊਟੈਂਟ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ ਵੀ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਇਸ ਲਈ, ਅਸਲ ਸਮੇਂ ਦੀ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਪੀਸੀਆਰ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਇਲਾਜ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦੇ ਮੁਲਾਂਕਣ ਅਤੇ ਡਰੱਗ ਸਹਿਣਸ਼ੀਲਤਾ ਨਿਗਰਾਨੀ ਵਿੱਚ ਲਾਗੂ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।

C. ਵਾਇਰਲ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦੀ ਉੱਚ-ਥਰੂਪੁਟ ਖੋਜ

ਨਵੀਆਂ ਪੈਦਾ ਹੋਈਆਂ ਛੂਤ ਦੀਆਂ ਬਿਮਾਰੀਆਂ ਦੇ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਨਿਦਾਨ ਲਈ ਲੋੜਾਂ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰਨ ਲਈ, ਡੀਐਨਏ ਚਿਪਸ (ਡੀਐਨਏ) ਵਰਗੀਆਂ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਉੱਚ-ਥਰੂਪੁਟ ਖੋਜ ਵਿਧੀਆਂ ਦੀ ਸਥਾਪਨਾ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ।ਡੀਐਨਏ ਚਿਪਸ ਲਈ, ਖਾਸ ਪੜਤਾਲਾਂ ਨੂੰ ਡੀਐਨਏ ਪ੍ਰੋਬ ਮਾਈਕਰੋਏਰੇ (ਡੀਐਨਏ) ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਬਹੁਤ ਉੱਚ ਘਣਤਾ ਵਿੱਚ ਛੋਟੇ ਸਿਲੀਕਾਨ ਚਿਪਸ ਨਾਲ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਅਤੇ ਜੋੜਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਜਿਸ ਨੂੰ ਨਮੂਨੇ ਨਾਲ ਹਾਈਬ੍ਰਿਡ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਹਾਈਬ੍ਰਿਡਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਦੇ ਸਿਗਨਲ ਨੂੰ ਕੰਫੋਕਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪ ਜਾਂ ਲੇਜ਼ਰ ਸਕੈਨਰ ਦੁਆਰਾ ਚਿੱਤਰਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਕੰਪਿਊਟਰ ਦੁਆਰਾ ਅੱਗੇ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ ਅਤੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਜੀਨਾਂ ਬਾਰੇ ਵਿਸ਼ਾਲ ਡੇਟਾ ਸੈੱਟ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਡੀਐਨਏ ਚਿੱਪ ਦੋ ਤਰ੍ਹਾਂ ਦੀ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।"ਸਿੰਥੇਸਿਸ ਚਿੱਪ" ਹੇਠ ਲਿਖੇ ਅਨੁਸਾਰ ਹੈ: ਖਾਸ ਓਲੀਗੋਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡਸ ਸਿੱਧੇ ਚਿਪਸ 'ਤੇ ਸੰਸ਼ਲੇਸ਼ਿਤ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।ਇਕ ਹੋਰ ਡੀਐਨਏ ਪੂਲ ਚਿੱਪ ਹੈ।ਕਲੋਨ ਕੀਤੇ ਜੀਨ ਜਾਂ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ ਸਲਾਈਡ 'ਤੇ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਛਾਪੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।ਡੀਐਨਏ ਚਿੱਪ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਦਾ ਫਾਇਦਾ ਵੱਡੀ ਮਾਤਰਾ ਵਿੱਚ ਡੀਐਨਏ ਕ੍ਰਮਾਂ ਦੀ ਇੱਕੋ ਸਮੇਂ ਖੋਜ ਕਰਨਾ ਹੈ।ਜਰਾਸੀਮ ਖੋਜ ਚਿੱਪ ਦਾ ਨਵੀਨਤਮ ਸੰਸਕਰਣ ਇੱਕ ਵਾਰ ਵਿੱਚ 1700 ਤੋਂ ਵੱਧ ਮਨੁੱਖੀ ਵਾਇਰਸਾਂ ਦੀ ਪਛਾਣ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਡੀਐਨਏ ਚਿੱਪ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਨੇ ਪਰੰਪਰਾਗਤ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਹਾਈਬ੍ਰਿਡਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੀਆਂ ਸਮੱਸਿਆਵਾਂ ਨੂੰ ਹੱਲ ਕੀਤਾ ਅਤੇ ਵਾਇਰਲ ਨਿਦਾਨ ਅਤੇ ਮਹਾਂਮਾਰੀ ਵਿਗਿਆਨ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ ਬਹੁਤ ਵਿਆਪਕ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ ਹਨ।